鏈霉素生產(chǎn)工藝實(shí)驗(yàn)論文
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- 摘要:本次課題利用實(shí)驗(yàn)室條件,模擬鏈霉素的工業(yè)生產(chǎn),首先對(duì)高產(chǎn)鏈霉菌進(jìn)行復(fù)壯和篩選然后進(jìn)行鏈霉素發(fā)酵試驗(yàn),最后進(jìn)行提取分離。
在鏈霉素的發(fā)酵過(guò)程中,我們先通過(guò)斜面孢子培養(yǎng),再通過(guò)搖瓶進(jìn)行種子培養(yǎng),同時(shí)利用正交試驗(yàn)確定出鏈霉素影響因子的作用為:玉米漿>葡萄糖>黃豆餅粉>(NH4)2SO4。從而計(jì)算出鏈霉素發(fā)酵生產(chǎn)的培養(yǎng)基除基礎(chǔ)培養(yǎng)基外還應(yīng)加入:葡萄糖4%,黃豆餅粉0.8%,玉米漿1.5%,(NH4)2SO4 0.5%。按照確定的培養(yǎng)基,放入7升發(fā)酵罐中進(jìn)行放大培養(yǎng)五天,每隔24小時(shí)測(cè)量包括PH值,DO值,還原糖濃度,鏈霉素效價(jià),生物量等參數(shù)。還原糖濃度、鏈霉素效價(jià)和生物量的測(cè)量分別采用的是DNS法,紫外分光光度法(比色法)和干重法。參數(shù)分析后得到解決以下結(jié)論:(1) 隨著鏈霉素發(fā)酵培養(yǎng)中糖的消耗,鏈霉素的效價(jià)也是降低的。說(shuō)明一次性投料,糖源供應(yīng)不夠。
(2) PH值在5.2時(shí),鏈霉素效價(jià)達(dá)到最高,將近4500U/ml。由此確定鏈霉素發(fā)酵培養(yǎng)的最適PH值最好控制在這一值上。
(3) 鏈霉菌是好氧菌,菌體的生產(chǎn)及發(fā)酵產(chǎn)物的積累都要消耗氧。因此發(fā)酵過(guò)程當(dāng)中需保證必須的供氧量。
(4) 生物量與鏈霉素產(chǎn)物的量是此消彼長(zhǎng)的關(guān)系。
根據(jù)參數(shù)的變化,我們以單位體積功率相等的原則改變攪拌轉(zhuǎn)速及空氣流量來(lái)進(jìn)行發(fā)酵容積從7升到50升發(fā)酵罐的擴(kuò)大設(shè)計(jì),結(jié)果放大后的轉(zhuǎn)速由300r/min變?yōu)?28r/min。
試驗(yàn)中,我們用陽(yáng)離子交換法和膜分離兩種方法對(duì)鏈霉素發(fā)酵液的分離提取進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果發(fā)現(xiàn)用膜分離法進(jìn)行提取后產(chǎn)物的效價(jià)以及產(chǎn)品的純度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于用陽(yáng)離子交換法的。
本次課題,將所得試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析后,我們得出鏈霉素制備的優(yōu)化主要包括以下兩個(gè)方面: (1)鏈霉素的培養(yǎng)基(2)發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)參數(shù)的控制。
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